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    elisa試劑盒中常用的防腐劑有哪些呢?

    發(fā)布時間: 2021-11-24  點擊次數(shù): 1948次
     
      elisa試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復性好的elisa試劑盒,其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡練、作用區(qū)分客觀等要素,適宜于大規(guī)模篩查實驗又能夠用于少數(shù)標本的檢查,能夠做定性實驗也能夠做定量分析。
      試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
      elisa試劑盒中常用的防腐劑有:
      1、疊氮鈉是HRP的抑制劑,凡是和HRP接觸的試劑,一定不能用;
      2、硫柳汞在ELISA試劑中可普遍使用,但因其有毒,較少使用;
      3、市面許多試劑盒產品,用抗生素做防腐劑較多,如慶大。
      4、如果試劑僅在實驗室短期使用,其實并不需加防腐劑,常規(guī)試劑放4度冰箱,抗體、酶等加甘油分裝凍存即可。
      5、防污染可添加0.02%的疊氮鈉,或0.01%的硫柳汞。疊氮鈉在多數(shù)情況下有用且有效,但在有些實驗中卻不合適,因為它能阻斷細胞的電子傳遞鏈,對許多生物體都有毒性,因此不能用于活體實驗;因為含有氨基而能干擾許多標記方法;不能用于辣根過氧化物酶標記的抗體。而硫柳汞不含氨基,不影響基質的穩(wěn)定性。如果將抗體應用于生物活性檢測、體內實驗,一般不使用任何防腐劑,這些實驗用的抗體應少量分裝冷存,切忌反復凍融。
      6、吐溫-20是作為穩(wěn)定劑,可減少非特異性黏合。
      7、甘油是防止凍融過程中的固-液相變而引起蛋白變性,能有效地增強蛋白質的穩(wěn)定性,-20度凍存時甘油的濃度可以在20~30%。
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