熒光探針作用用途：
常用于熒光免疫法中標記抗原或抗體，亦可用于微環(huán)境，如表面活性劑膠束、雙分子膜、蛋白質(zhì)活性位點等處微觀特性的探測。通常要求探針的摩爾吸光系數(shù)大，熒光量子產(chǎn)率高；熒光發(fā)射波長處于長波且有較大的斯托克斯位移；用于免疫分析時，與抗原或抗體的結(jié)合不應影響它們的活性。
也可用于標記待定的核苷酸片斷，用與特異性地、定量地檢測核酸的量。
熒光探針分類檢測：
目前常用的熒光探針有熒光素類探針、無機離子熒光探針、熒光量子點、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質(zhì)的定量分析外，在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術(shù)以及DNA測序上都有著廣泛的應用。
目前，檢測熒光探針的方法主要有單點測定和電荷耦合裝置熒光成像。由于光電倍增管點掃描時間較長，激光照射強度高，很難抓住熒光早期變化。而CCD熒光成像的面陣大，成像視野廣，成像時間可以調(diào)節(jié)，因而檢測效果比較好。
化學發(fā)光檢測的zui大特點是設(shè)備簡單、操作簡便、分析速度快及靈敏度高?；瘜W發(fā)光成像分析(CLI)是將化學發(fā)光與成像技術(shù)相結(jié)合，從而具有分辨率高、多樣品同時檢測、光譜響應范圍寬以及靈敏度高等特點[10,11]，已廣泛應用于凝膠、蛋白印記及微陣列芯片中的化學發(fā)光信號檢測。本實驗建立了TCPO?咪唑?H2O2?熒光探針化學發(fā)光成像體系。由于化學發(fā)光不需要任何光源，因而在對熒光探針進行化學發(fā)光成像檢測時，不存在熒光檢測或者熒光成像時不可避免的光學背景的干擾，從而可以獲得更低的檢出限。用此體系對5種熒光探針進行定量分析，并研究了用四甲基異硫氰酸羅丹明標記的單克隆羊抗人IgG的化學發(fā)光成像，檢出限達10-11mol/L，比相同條件下熒光成像的檢出限低一個數(shù)量級。
