使用組織細胞固定液的意義
使用組織細胞固定液,簡單來說就是起到固定的目的。具體來說有以下幾種作用:
1、能防止細菌的腐蝕和組織的自溶。細菌無處不存在,它們隨時都可污染腐蝕未經(jīng)處理的組織。組織細胞固定液可以固定任何蛋白質(zhì),凡有生命的東西,都由蛋白質(zhì)組成,蛋白質(zhì)被固定,生命就停止,細菌也就失去了活力。另者,在日常生活中,人們??膳龅竭@樣的問題,一塊肉不經(jīng)處理放了幾天后就會變質(zhì),這是為什么呢?除了細菌參與外,其本身也是很重要的。因為組織離體后,供應這此組織的血液隨之消失,細胞缺氧,細胞內(nèi)溶酶體膜的結(jié)構(gòu)受到破壞,破壞后釋放出溶酶體酶,日常生活中常碰到的肉變質(zhì),就是細菌污染加組織自溶的結(jié)果。
2、保存細胞固有的物質(zhì),能凝固或沉淀細胞內(nèi)或組織液,糖原等,使細胞或組織基本上保持與生活時的物質(zhì)一樣。細胞的固有物質(zhì),即細胞核、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、高爾基器、溶酶體、過氧體,細胞骨架,組織液,抗原、糖元等。這些物質(zhì),如果不將其及時固定,是很容易喪失的,尤其是溶酶體,很容易受到破壞,因此應特別小心。
3、保存好大體標本。對于有教學任務的醫(yī)院病理科,除搞好疾病的診斷外,還有收集有價值的大體標本,有些大體標本,是很難得到的。因此要求在平時就要留心觀察,小心處理。遇到有教學價值的罕見的典型的標本,就必須及時固定,認真給予對待。
4、使組織硬化,便于切塊。剛離體的組織,除了胃組織以外,都是柔軟的組織,尤其是胃腸道的組織,如果在沒有固定時就取材,效果就很差,不是取材不規(guī)整,就是厚薄不均,粘膜和肌層很容易分開,因此,要取得規(guī)整標致的材料,就必須將組織*固定,再行取材。
5、對某些具有傳染性的標本,能防止疾病的擴散。病理標本、種類繁多,成份復雜,各種病例都有,具有傳染性的病種也不少,如結(jié)核、肝炎、麻風、性病等等。對于此類標本,應進行*的固定后,再行取材,如結(jié)核球,固定時間應在3-5天。
6、可增強染色的作用。組織經(jīng)過及時的固定,zui終可見到切片有鮮艷的染色,而如果有一批未經(jīng)及時固定的組織,將看到zui終的結(jié)果是,核染色不清楚,灰淡色,由此可得結(jié)論,固定可以增強染色的作用。
使用組織細胞固定液的要點有以下幾點:
1、組織固定越新鮮越好。組織一經(jīng)離體,就能及時地固定,這是的。根據(jù)實驗,如果要獲得某些酶的染色,固定在組織離體后30秒至1分鐘。對于其它達不到些要求是越快越好。
2、組織固定,組織塊不宜過大。凡是需要固定的組織,都不應該太大太厚,這是因為所有的固定液穿透力不夠強,浸透度不夠快的緣故。如果較大厚的組織,不經(jīng)處理就進行固定,那么待固定液進入至中間對可能這些組織早就發(fā)生自溶了。因此,對于較大的組織,必須先進行處理,切成制片材料再行固定,這是*的處理方法。
3、組織固定,時間不宜太短,也不宜太長。時間太短,就不能很多的固定組織,因為不管組織大小,固定液浸入組織之中,都需要有一定的時間,時間太短,就會影響組織固定的效果,對以后一系列關系的處理都有影響,切片質(zhì)量難以保證,固定時間太長,也不好。組織長時間的固定,福爾馬林會產(chǎn)生一種酸,影響核的染色。
4、對不同類型的組織應適當合理地選擇組織細胞固定液,特殊病例或特殊物質(zhì)應選擇特殊的組織細胞固定液。有的固定液對于組織有膨脹作用。固定劑是一種化學試劑,有液體和固體之分,一般使用較多的是液體,而固體固定劑如多聚甲醛,則多用于實驗研究的組織固定。
5、組織的第二次固定或后固定。在一般的常規(guī)病理活檢組織中,往往用一種組織細胞固定液,就能夠達到目的,獲得滿意的結(jié)果。但是,對于某些特殊病例光用一種固定液是不夠的,必須根據(jù)不同的情況,使用特殊的固定液再次將組織固定,或者在切片后染色前再行固定。這種方法稱為二次固定或后固定。